午夜欧美理论片,中文在线不卡,久久电影tv,国产精品一区二区久久精品爱涩

新聞中心

News Center

當前位置:首頁新聞中心在微量滴定板中表達可溶性scFv

在微量滴定板中表達可溶性scFv

更新時間:2013-03-05點擊次數:1438

[器材和試劑]
● 用于細菌培養的96孔圓底微量滴定板 (Nunc, 目錄號62162)
● 含100ug/ml氨芐青霉素和0.1%葡萄糖的2XTY培養基(2 ×TY/amp/
0.1%glu)
● 含100ug/ml氨芐青霉素和3mmol/L IPTG的2XTY培養基(2×TY/amp/glu/IPTG)(參見實驗方案13.10)
● 噬菌體樣品

[方法]
1.用96孔無菌轉移設備或移液器從主板中,每孔取2ul;而后轉移至1個每孔含有100ul 2×TY/amp/0.1%glu的無菌96孔微量滴定板中。
2.將孔板在37℃振蕩孵育,直到A600值約為0.9(通常需2~3小時)。
3.每孔加50ul 2XTY/amp/glu/IPTG(zui終IPTG濃度為lmmol/L)。繼續將孔板在30℃振蕩16小時。
4.以2700r/min離心孔板15分鐘;取上清可進行ELISA.

純化scFv片段zui簡單的方式是:在其C末端添加六組氨酸標簽,再用固相金屬離子親和層析(1MAC)進行蛋白純化。大多數用于IMAC的試劑現在已加工為試劑盒銷售,并附有詳盡的說明。不過,應當注意的是,試劑盒中所提供的實驗方案也許要根據不同的scFv載體構建類型加以調整。例如,我們發現:對在His標簽前帶有myc標簽的scFv洗滌時,該咪唑濃度(20mmol/L)比攜帶了其他標簽的scFv的咪唑洗滌濃度(5mmol/L)更高一些。
m.torrentyo.com

主站蜘蛛池模板: 如东县| 皮山县| 满洲里市| 湘潭县| 博湖县| 朔州市| 华容县| 仁寿县| 平潭县| 嵊泗县| 芦山县| 射阳县| 丹阳市| 灵石县| 外汇| 巴中市| 波密县| 石景山区| 兴海县| 盐津县| 大新县| 高青县| 肃南| 临沧市| 阳朔县| 义马市| 长春市| 灵川县| 丰顺县| 南郑县| 余姚市| 盐边县| 台中市| 漳州市| 张家口市| 博野县| 镇原县| 普洱| 喀喇| 沾益县| 阿瓦提县|